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人白介素17(IL-17)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)
BS-9770人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒
一、產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA),專用于定量檢測(cè)人血清、血漿及相關(guān)生物液體樣本中白細(xì)胞介素17(IL-17)的含量。IL-17是一種由Th17細(xì)胞分泌的促炎細(xì)胞因子,在自身免疫疾病和炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。
二、檢測(cè)原理
雙抗體夾心技術(shù):
預(yù)包被抗人IL-17單抗的微孔板捕獲樣本中的IL-17。
加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗,形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
通過(guò)TMB顯色反應(yīng),顏色深淺與IL-17濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)。
三、試劑盒組成
組分規(guī)格(96孔配置)保存條件
酶標(biāo)包被板1×96孔2–8℃
標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L)0.5ml×1瓶2–8℃(長(zhǎng)期-20℃)
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶2–8℃
酶標(biāo)試劑6ml×1瓶2–8℃
樣品稀釋液6ml×1瓶2–8℃
顯色劑A/B液各6ml×1瓶2–8℃避光
終止液6ml×1瓶2–8℃
濃縮洗滌液20ml×30倍×1瓶2–8℃
說(shuō)明書(shū)1份室溫
四、樣本處理要求
血清/血漿:
室溫靜置10–20分鐘,2000–3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,取上清液
避免反復(fù)凍融,若出現(xiàn)沉淀需再次離心
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
離心后取上清,檢測(cè)分泌性成分時(shí)需無(wú)菌操作
尿液/組織勻漿:
尿液離心后取上清;組織樣本需勻漿后離心分裝
五、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:
梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品(如270ng/L至1ng/L),每孔加樣50μL
樣本加樣:
樣本稀釋后加10μL至微孔,加樣量40μL(總稀釋度5倍)
溫育:
37℃避光反應(yīng)30分鐘,封板膜覆蓋
洗滌:
洗滌液浸泡1分鐘/次,重復(fù)3–5次,拍干孔內(nèi)液體。
顯色與終止:
加入TMB顯色液避光反應(yīng)15–20分鐘,終止液終止反應(yīng)。
讀數(shù):
酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。
六、性能指標(biāo)
靈敏度:低至0.1pg/mL(小鼠IL-17參考值) ,人IL-17約3.8pg/mL。
檢測(cè)范圍:7.8–500pg/mL(人IL-17C參考值) ,或31.3–2000pg/mL(人IL-17)。
特異性:與IL-17家族其他成員(如IL-17B、IL-17F)無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)/板間變異系數(shù)<10%
七、注意事項(xiàng)
保存條件:
試劑盒2–8℃保存,標(biāo)準(zhǔn)品長(zhǎng)期存放需-20℃
有效期:
6個(gè)月(4℃),12個(gè)月(-20℃)。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境:
避免強(qiáng)光照射,顯色液需37℃預(yù)平衡。
八、參考文獻(xiàn)
雙抗體夾心法原理及操作規(guī)范
樣本處理與保存指南
試劑盒性能驗(yàn)證數(shù)據(jù)
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
人白介素17(IL-17)ELISA檢測(cè)試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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