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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒實驗原理
發(fā)布時間:2025/9/11瀏覽:88次
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  大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒的實驗原理

  BS-3017 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒

  基于?雙抗體夾心法?,其核心流程與VEGF家族其他成員(如VEGF-A)的檢測方法類似,具體步驟如下:

  實驗原理詳解

  抗體包被?

  微孔板預(yù)先包被抗VEGF-B的特異性捕獲抗體,形成固相抗體層,用于結(jié)合樣本中的目標(biāo)抗原?。

  抗原-抗體結(jié)合?

  樣本(如血清、組織勻漿)與標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中,VEGF-B與捕獲抗體結(jié)合,形成“固相抗體-抗原"復(fù)合物?。

  酶標(biāo)抗體反應(yīng)?

  加入生物素標(biāo)記的檢測抗體(或HRP標(biāo)記的二抗),與抗原的另一表位結(jié)合,形成“捕獲抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。

  顯色與定量?

  加入TMB底物后,酶催化反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,終止后變?yōu)辄S色。通過酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),其強(qiáng)度與VEGF-B濃度呈正相關(guān)?。

  關(guān)鍵特點

  特異性?:雙抗體設(shè)計確保對VEGF-B的高特異性,避免與其他VEGF家族成員交叉反應(yīng)?。

  靈敏度?:檢測范圍通常為31.2–2000pg/mL,適用于低濃度樣本分析?。

  樣本兼容性?:支持血清、血漿等樣本類型,需注意抗凝劑選擇(如EDTA)以避免干擾?。

  注意事項

  實驗需嚴(yán)格控制孵育時間(通常37℃ 60分鐘)和洗滌次數(shù),以減少背景信號?。

  顯色反應(yīng)需避光操作,終止后30分鐘內(nèi)完成檢測以保證數(shù)據(jù)穩(wěn)定性?。

  如需進(jìn)一步了解VEGF-B的生物學(xué)功能或?qū)嶒瀮?yōu)化細(xì)節(jié),可參考相關(guān)文獻(xiàn)或試劑盒說明書?。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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