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人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/8/5瀏覽:137次
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  以下是?人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒?的實驗使用說明書核心內容:

  BS-0638人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用?雙抗體夾心法?:

  微孔板預包被抗人CFH抗體捕獲樣本中的CFH

  加入HRP標記的檢測抗體形成復合物

  TMB顯色(藍色→黃色),450nm測OD值,濃度與吸光度正相關

  二、試劑盒組成

  組分 規(guī)格(96T/48T) 保存條件

  預包被微孔板 1×96孔/1×48孔 2-8℃

  CFH標準品(凍干) 0.5mL×6管(0-40ng/mL) -20℃

  HRP標記抗體 6mL/3mL 2-8℃

  TMB底物 9mL/6mL 避光4℃

  20×洗滌緩沖液 25mL/15mL(需1:20稀釋) 室溫

  三、樣本處理

  血清/血漿?:3000×g離心10-20分鐘,避免溶血或脂血

  組織勻漿?:生理鹽水研磨后離心取上清

  保存要求?:-20℃分裝,避免反復凍融(≤3次)

  四、操作步驟

  平衡試劑?:所有組分室溫平衡20分鐘

  標準品復溶?:加0.5mL稀釋液溶解凍干標準品

  加樣溫育?:

  依次加入標準品/樣本50μL→檢測抗體50μL

  37℃孵育60分鐘

  洗滌?:手工洗板5次(每孔加滿洗滌液靜置1分鐘)

  顯色?:加入TMB 100μL,避光反應15分鐘

  終止?:加終止液50μL,10分鐘內測OD450nm

  五、注意事項

  靈敏度?:1.88-8.54ng/mL(不同品牌差異)

  精密度?:板內CV<10%,板間CV<15%

  干擾因素?:避免細菌污染、反復凍融或劇烈震蕩樣本

  失效判斷?:陰性對照OD值≥0.12需棄用

  六、結果計算

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,樣本濃度需乘以稀釋倍數。建議使用生工生物或艾美捷科技等供應商提供的專業(yè)分析軟件。

  注:不同品牌試劑盒參數可能存在差異,請以實際隨貨說明書為準。

  注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術 老師或品牌供應商。

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