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本生分享Elisa試劑盒實驗的技巧及注意事項
更新時間:2025-09-12瀏覽:87次

  本生分享Elisa試劑盒實驗的技巧及注意事項

  以下是ELISA試劑盒實驗的關(guān)鍵技巧與注意事項總結(jié),本生結(jié)合操作規(guī)范與常見問題解決方案:

  一、實驗前準備?

  試劑平衡?

  所有試劑需提前30分鐘室溫平衡(20-25℃),避免溫度差異導致反應不均?。

  標準品溶解后需靜置10-30分鐘,避免渦旋震蕩導致蛋白變性?。

  移液器校準?

  移液槍誤差需<2%,每年至少校準一次,日常可用純水自查?。

  加樣時選擇量程的35%-100%范圍(如20μL用20-200μL槍)?。

  二、加樣操作技巧?

  加樣規(guī)范?

  槍頭懸空45°貼壁加樣,避免觸碰孔底或產(chǎn)生氣泡?。

  每孔加樣量誤差需<5%,復孔加樣時間差≤5分鐘?。

  順序控制?

  加樣順序需一致(如標準品→樣本→抗體),顯色時間需同步?。

  漏加樣本需記錄,不可補加(避免交叉污染)?。

  三、孵育與洗滌?

  孵育條件?

  37℃避光孵育(誤差±0.5℃),震蕩孵育可提高反應效率?。

  封板膜需一次性使用,避免多次開閉導致污染?。

  洗滌要點?

  手工洗板需垂直拍干,機器洗板需檢查沖洗頭是否堵塞?。

  洗滌次數(shù)≥3次(含0.05% Tween-20),每次30秒?。

  四、顯色與終止?

  顯色控制?

  TMB底物需全程避光,顯色時間20分鐘(最長不超過30分鐘)?。

  顯色過強時需提前終止(最高標準品顯色達平臺期)?。

  終止反應?

  終止液加入后5分鐘內(nèi)讀數(shù),避免信號衰減?。

  五、常見問題處理?

  問題? ?解決方案?

  高背景值 增加封閉時間(1-2小時)或洗滌次數(shù)?

  標準曲線R2<0.98 檢查標準品稀釋是否充分混勻?

  顯色不均 檢查底物是否避光保存或酶標抗體失效?

  注:不同品牌試劑盒參數(shù)可能差異較大,建議以實際說明書為準。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應商。

  ELISA試劑盒 移液器 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標,本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒

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